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IP裂解液

货号:G2038-100ML

品牌:Servicebio

价格:¥100

规格: 100ml

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  银河在线娱乐简介:

  IP裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞或组织的裂解液,可保留细胞内的蛋白与蛋白或蛋白与核酸之间相互作用。本裂解液裂解的样本,主要应用于免疫沉淀IP(ImmunolPrecipitation)、免疫共沉淀(co-IP)、ChIP(ChromatinImmunopre-cipitation)等特殊实验。其主要成分为Tris-Hcl,NaCl, EDTA-Na2, NP-40, Sodium deoxycholate。

  包装内容:

银河在线娱乐货号 银河在线娱乐名称 规格
G2038 IP裂解液 100 mL

  保存条件: 4℃保存,有效期12个月。

  操作说明:

  对于组织样品:

  1.组织块用冷PBS洗涤,去除血污。剪成小块置于匀浆器中。

  2.加入10倍组织体积本试剂(使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂)冰上彻底匀浆。

  3.将匀浆液转移至1.5 mL离心管中,振荡。冰浴30 min,期间用移液器反复吹打,确保细胞完全裂解。

  4.12000g离心5 min,收集上清,即为总蛋白溶液。

  对于培养细胞样品:

  1.对于贴壁细胞:

  a.用PBS冲洗细胞2-3次。最后一次彻底吸干残留液。

  b.加入适当体积本试剂(使用前数分内加入蛋白酶抑制剂)于培养板、瓶内3-5 min。期间反复晃动培养板、瓶,使试剂与细胞充分接触。

  c.用细胞刮刀将细胞及试剂刮下,收集到1.5mL离心管中。

  2.对于悬浮细胞:

  离心收集细胞,每6孔板细胞加约250 uL本试剂(在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂),振荡。

  冰浴30 min,期间每10 min用200uL移液器反复吹打数次,确保细胞完全裂解。

  3.12000g离心5min,收集上清,即为总蛋白。

  注意事项:

  对于组织样品:

  每50mg组织约加入1mL的本试剂裂解。对于软骨、皮肤等组织,可适当减少试剂用量,以提高蛋白浓度。

  对于培养细胞样品:

  1.正常细胞密度下,每个6孔板细胞加入250uL左右裂解液。其它类推。

  2.裂解时可能会出现较粘稠状。可用移液器反复吹打,直至呈液状为止。如果一直较稠,可用涡旋仪振荡或再加入适量裂解液。

  3.此试剂对人体有害,请适当防护。